賽默飛液相色譜U3000/DGLC/Vanquish使用問題

軟件問題

提示后密封清洗液用完，添加后密封清洗液后仍然報(bào)錯(cuò)

重新啟動蠕動泵：進(jìn)入泵界面—More Options—將Rear Seal Wash的模式由Idle改為Active，點(diǎn)擊enter即可

柱溫箱溫度已達(dá)到規(guī)定范圍，但仍顯示未就緒

柱溫箱的平衡時(shí)間設(shè)置過長，可在儀器方法中修改

如何查看紫外燈能量

VWD：打開UV界面的“Wellness"選項(xiàng)即可查看燈壽命和使用時(shí)間；DAD：打開UV界面的“Wellness"選項(xiàng)可查看燈的使用時(shí)間，在Startup界面可查看燈能量

如何設(shè)置序列或者進(jìn)樣完成后自動打印/導(dǎo)出報(bào)告

在Queue界面的“Report setup"項(xiàng)下進(jìn)行設(shè)置

峰面積較小的色譜峰無法自動積分

在Cobra向?qū)е性O(shè)置合適的基線噪聲范圍、Cobra平滑寬度和小峰面積

如何去掉報(bào)告中的變色龍水印

打開管理控制臺——全局策略——水印，將“打印水印"的勾去掉即可

Vanquish自動進(jìn)樣器無法自動識別樣品盤類型

1）齒輪松動，聯(lián)系工程師；2）樣品盤上的二維碼損壞或有液滴；3）正確放置樣品盤，使A1號位在左后方

Vanquish自動進(jìn)樣器無法正常進(jìn)樣

重新關(guān)好自動進(jìn)樣器的門

Vanquish自動進(jìn)樣器是否需要校正針位

不需要

壓力升高

色譜條件發(fā)生改變（如柱溫、流速、有機(jī)相種類等發(fā)生變化）

比較相同條件下壓力的變化趨勢，若壓力升高，再按照下述原因進(jìn)行排查

保護(hù)柱的柱芯污染

更換新的柱芯

進(jìn)樣閥load狀態(tài)壓力正常，切至inject狀態(tài)時(shí)壓力升高，可能是六通閥或進(jìn)樣針堵塞

超聲進(jìn)樣針/六通閥的定子和轉(zhuǎn)子，若無效則更換

靜態(tài)混合器堵塞

反沖靜態(tài)混合器，無效則更換。平常操作時(shí)：流動相的純度需要滿足分析檢測的要求、檢測泵內(nèi)密封圈的密封性

針座密封堵塞

對針座密封超聲清洗

色譜柱填料塌陷引起流通池堵塞

反沖流通池（注意壓力：DAD/VWD耐壓120bar；FLD耐壓20bar），無效則聯(lián)系工程師

壓力傳感線接觸不良

重新拔插壓力傳感線。平常操作時(shí)注意不要觸摸到壓力傳感線接頭

新色譜柱壓力逐漸升高

新色譜柱的填料在流動相作用下逐漸壓實(shí)，柱壓會逐漸升高，但使用一段時(shí)間后，相同條件下壓力會趨于穩(wěn)定

色譜柱污染

按照色譜柱說明書進(jìn)行沖洗和在生，無效則更換

CAD的噴針堵塞

取出噴針進(jìn)行超聲清洗（注意針尖不要和瓶底接觸）。建議檢測器入口安裝不銹鋼過濾器，阻止柱填料流失

排氣泡時(shí)未擰松purge閥

排氣泡前逆時(shí)針擰松1.5~2圈

柱前預(yù)熱或者柱后冷卻器堵塞

反沖，需要時(shí)更換

壓力ZUI高限設(shè)置不合適引起壓力超限

根據(jù)色譜柱和儀器耐受的壓力范圍設(shè)置合適的限值

樣品/緩沖鹽析出引起管路堵塞

先采用可溶性的溶劑沖洗流路。平常操作時(shí)：若流動相含有緩沖鹽，建議色譜柱先沖洗大比例水再采用初始流動相平衡；為避免樣品在流動相中析出，建議采用初始流動相溶解樣品

壓力降低

色譜條件發(fā)生改變（如柱溫、流速、有機(jī)相種類等發(fā)生變化）

比較相同條件下壓力的變化趨勢，若壓力降低，再按照下述原因進(jìn)行排查

管路沒有擰緊導(dǎo)致溶液泄露

重新擰緊泄露處的管路

流動相走空

加入流動相并重新排氣泡。建議在儀器方法中設(shè)置合適的壓力低限

系統(tǒng)流路中含有大量氣泡

重新對流動相排氣泡，待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣

過濾頭堵塞：某通道溶液無法抽出，取下過濾頭后恢復(fù)正常

超聲清洗過濾頭，無效則更換

單向閥堵塞：所有通道的溶液均無法抽出

超聲清洗單向閥，無效則更換

脫氣機(jī)管路堵塞：某通道溶液無法抽出，短接脫氣機(jī)后恢復(fù)正常

沖洗脫氣機(jī)管路。平常操作時(shí)建議每周采用甲醇清洗脫氣機(jī)管路，尤其水相通道

比例閥損壞：某通道溶液無法正常抽出，更換比例閥接口后恢復(fù)正常

聯(lián)系工程師

針座密封發(fā)生漏液

更換針座密封

排氣后忘記關(guān)閉Purge閥

流動相排完氣泡后及時(shí)擰緊purge閥，但不需要擰得過緊

purge閥密封性變差

更換新的purge閥

壓力傳感線接觸不良

重新拔插壓力傳感線。平常操作時(shí)注意不要觸摸到壓力傳感線接頭

進(jìn)樣時(shí)吸入空氣

1）設(shè)置合適的進(jìn)樣高度；2）樣品量太少時(shí)可加襯管

進(jìn)樣瞬間壓力下降，后又恢復(fù)正常

U3000：正常現(xiàn)象，吸入的樣品溶液沒有經(jīng)過預(yù)壓縮，為常壓狀態(tài)，高壓的流動相與常壓樣品接觸時(shí)會引起壓力下降；Vanquish：不會出現(xiàn)該情況

轉(zhuǎn)子發(fā)生磨損，導(dǎo)致部分流動相及樣品溶液直接排廢

更換轉(zhuǎn)子

單向閥裝反

重裝單向閥

壓力波動

流動相含有氣泡（一般呈規(guī)律的鋸齒狀波動）

重新對流動相排氣泡，待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣

過濾頭部分堵塞；流動相瓶及低壓區(qū)輸液管路被菌類或藻類污染

超聲清洗過濾頭和流動相瓶，沖洗低壓區(qū)輸液管路。平常操作時(shí)建議每周采用甲醇清洗脫氣機(jī)管路，尤其水相通道

單向閥部分堵塞

超聲清洗單向閥，無效則更換。平常操作時(shí)：建議儀器不要長期保存在純乙腈中；若流動相中緩沖鹽濃度過高可增加泵前溶液的混合體積

輸液泵的密封圈發(fā)生泄漏

更換輸液泵的柱塞桿或密封圈

流動相混合不均勻

1）更換更大的靜態(tài)混合器；2）若為等度分析，可將流動相提前混合

進(jìn)樣后壓力不穩(wěn)定，且保留時(shí)間重現(xiàn)性不佳

在儀器方法的自動進(jìn)樣器界面設(shè)置與泵同步

脫氣盒損壞

聯(lián)系工程師。平常操作時(shí)，建議：1）所有流動相的過濾頭均置于液面以下，減少真空泵的工作負(fù)荷；2）使用正相溶劑時(shí)短接脫氣機(jī)

比例閥損壞

聯(lián)系工程師

計(jì)量泵裝置密封圈發(fā)生泄漏

更換計(jì)量泵的柱塞桿或密封圈

保留時(shí)間前移

色譜條件發(fā)生改變（如柱溫、流速、有機(jī)相種類等發(fā)生變化）

比較相同條件下保留時(shí)間的變化趨勢，若前移，再按照以下原因進(jìn)行排查

流動相混合不均勻

1）更換更大的靜態(tài)混合器；2）若為等度分析，可將流動相提前混合

色譜柱未充分平衡

延長系統(tǒng)的平衡時(shí)間，尤其當(dāng)流動相中含有離子對試劑時(shí)

色譜柱污染

表面活性劑污染時(shí)該現(xiàn)象尤為明顯，根據(jù)色譜柱的說明書進(jìn)行沖洗，需要時(shí)更換色譜柱

固定相塌陷

更換色譜柱。平常操作時(shí)：在色譜柱規(guī)定范圍內(nèi)進(jìn)行使用

緩沖鹽吸潮導(dǎo)致配置的濃度過低

將易潮解的鹽置于干燥器中保存

保留時(shí)間后移

色譜條件發(fā)生改變（如柱溫、流速、有機(jī)相種類等發(fā)生變化）

比較相同條件下保留時(shí)間的變化趨勢，若后移，再按照以下原因進(jìn)行排查

流動相混合不均勻

1）更換更大的靜態(tài)混合器；2）若為等度分析，可將流動相提前混合

轉(zhuǎn)子發(fā)生磨損，導(dǎo)致部分流動相及樣品溶液直接排廢

更換轉(zhuǎn)子

色譜柱未充分平衡

延長系統(tǒng)的平衡時(shí)間，尤其當(dāng)流動相中含有離子對試劑時(shí)

系統(tǒng)流路含有氣泡

重新對流動相排氣泡，待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣

流動相組成發(fā)生變化

對于提前混合好的流動相，注意置于陰涼處密封保存

比例閥故障

聯(lián)系工程師

柱外死體積增加

更換內(nèi)徑更小、更短的管路進(jìn)行連接

保留時(shí)間不穩(wěn)定

單向閥堵塞

超聲清洗單向閥，無效則更換

平衡時(shí)間不足

延長系統(tǒng)的平衡時(shí)間，尤其當(dāng)流動相中含有離子對試劑時(shí)

流動相混合不均勻

1）更換更大的靜態(tài)混合器；2）若為等度分析，可將流動相提前混合

比例閥故障

聯(lián)系工程師

未設(shè)置柱溫

在儀器方法中設(shè)置合適的柱溫

系統(tǒng)流路含有氣泡

重新對流動相排氣泡，待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣

前延峰

分離不佳，大峰前部包有雜質(zhì)小峰

改進(jìn)色譜分析條件

柱頭前端過濾篩板部分堵塞

更換色譜柱或低流速反沖色譜柱

色譜柱塌陷

更換色譜柱,檢查色譜柱是否匹配此應(yīng)用條件（壓力或pH值范圍）

溶劑效應(yīng)

1）降低進(jìn)樣量；2）降低樣品溶解液洗脫強(qiáng)度；3）調(diào)換進(jìn)樣閥接口（U3000：調(diào)換進(jìn)樣閥4、5號位；Vanquish：調(diào)換進(jìn)樣閥1、2號位）

色譜柱過載

減少進(jìn)樣量或增加柱容量（選用更大內(nèi)徑色譜柱）

拖尾峰

分離不佳，大峰后部包有雜質(zhì)小峰

改進(jìn)色譜分析條件（緩沖鹽的濃度、流動相的pH值、洗脫條件等）

樣品與硅烷官能團(tuán)反應(yīng)（常規(guī)C18柱分析堿性化合物）

建議更換封尾色譜柱、特制色譜柱或添加三乙胺等掃尾劑

柱外體積過大

進(jìn)樣器和色譜柱間使用更短、更細(xì)的管路連接

色譜柱過載

減少進(jìn)樣量或增加柱容量（選用更大內(nèi)徑色譜柱）

色譜柱柱效下降

更換色譜柱或保護(hù)柱

檢測器響應(yīng)時(shí)間過長

使用推薦值

分叉峰或雙峰

分離不佳

改進(jìn)色譜條件

保護(hù)柱或色譜柱污染

1）更換保護(hù)柱；2）清洗或更換分析柱

柱頭死體積過大

更換合適的管路接頭或更換色譜柱（色譜柱前端塌陷）

溶劑效應(yīng)

1）降低進(jìn)樣量；2）降低樣品溶解液洗脫強(qiáng)度；3）調(diào)換進(jìn)樣閥接口（U3000：調(diào)換進(jìn)樣閥4、5號位；Vanquish：調(diào)換進(jìn)樣閥1、2號位）

色譜柱溫度影響

一般發(fā)生在色譜柱內(nèi)徑大于3 mm，并且溫度條件很高的情況下。選用預(yù)加熱來確保色譜柱中流動相溫度不會梯度變化

儀器轉(zhuǎn)子密封磨損

更換轉(zhuǎn)子密封

鬼峰

上一針樣品未全都洗脫

延長分析時(shí)間或改用梯度洗脫

進(jìn)樣器交叉污染

1）增加洗針程序；2）清洗或更換易污染部件，如針、針座密封

CAD檢測器被污染

以50%甲醇沖洗

流動相、色譜柱或流通池污染

逐一排查原因，采取相應(yīng)措施，如是流通池污染可采用異丙醇以0.2ml/min低流速沖洗，特別注意水相流動相的污染

流通池有氣泡

排除氣泡

不出峰

未進(jìn)樣，或進(jìn)樣量不足

1）保證樣品瓶中樣品量足夠；2）檢查進(jìn)樣類型是否為“Blank"

過高的背景電流/噪音（CAD）

選擇純度較高的流動相

樣品容易揮發(fā)（CAD）

查看分析物的蒸氣壓

色譜柱柱效下降

按照說明書對色譜柱進(jìn)行在生，無效則更換色譜柱

負(fù)峰

不合適的參比波長（DAD）或RI檢測器參比池未充分沖洗 

DAD：設(shè)置合適的參比波長或不使用該功能；RI：增加平衡時(shí)間

樣品溶解液與流動相差別太大

使用流動相溶解樣品

洗脫物比流動相吸收值低

更換波長或使用低吸收溶劑做流動相

錯(cuò)誤的信號輸出極性

檢查信號輸出極性，請打400電話

廢液引起（CAD） 

確保PEEK管在廢液瓶中

數(shù)據(jù)處理時(shí)設(shè)置了色譜圖扣除命令

不使用色譜圖扣除的功能

RI檢測器未關(guān)閉參比池通道（樣品連續(xù)流過樣品池和參比池）

關(guān)閉參比池通道

霧化針污染（CAD）

異丙醇超聲清洗霧化針，無效則更換

毛刺峰

流通池進(jìn)氣泡

流通池出口增加長度的背壓管，但不能超過流通池的耐壓范圍（注意：FLD流通池耐壓＜20bar，不能增加被壓管）

電壓不穩(wěn)或儀器接地不正確

常見于CAD/ECD，打400電話

CAD檢測器被污染

以50%甲醇沖洗，無改進(jìn)打400電話

峰面積減小

進(jìn)樣器堵塞

逐段排查阻塞點(diǎn)，需要時(shí)請打400電話

檢測器燈能量偏低

更換新燈

檢測波長設(shè)置不合理

設(shè)置合理的檢測波長

待測物降解

使用合適的保存條件，如使用含溫控單元的自動進(jìn)樣器

CAD霧化溫度過高，半揮發(fā)成份流失

降低霧化溫度

儀器有漏液

檢查漏液位置

峰面積重現(xiàn)性差

自動進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子密封/針座密封發(fā)生磨損

更換新的轉(zhuǎn)子密封/針座密封，需要時(shí)請打400電話

進(jìn)樣針的針尖彎曲或堵塞

超聲清洗進(jìn)樣針（注意針尖不要接觸瓶底），無效則更換

進(jìn)樣前針位未處于inject狀態(tài)

進(jìn)樣前，保證針位處于inject狀態(tài)

進(jìn)樣器的注射器進(jìn)氣泡

進(jìn)樣前執(zhí)行灌注注射器命令排除注射器內(nèi)氣泡，需要時(shí)需手動排氣泡

自動進(jìn)樣器抽樣速度過快

降低進(jìn)樣針的抽樣速度，使抽樣時(shí)間至少3-5秒

自動進(jìn)樣器的注射器密封不嚴(yán)/注射器三通閥磨損

更換新的注射器/注射器三通閥，需要時(shí)請打400電話

基線周期性波動

泵壓力波動

采集壓力通道的信號，尋找壓力波動的原因

管路或流通池中有氣泡

流動相充分脫氣

基線無規(guī)律波動

溫度波動

控制好溫度，使用對溫度較敏感的RI檢測器時(shí)要尤為注意

流動相混合不均勻

1）更換更大的靜態(tài)混合器；2）若為等度分析，可將流動相提前混合

檢測器燈能量過低

更換新燈

流通池被污染

用不同極性溶劑沖洗流通池

流動相或色譜柱被污染

更換流動相或色譜柱

電壓不穩(wěn)或儀器接地不正確

常見于CAD/ECD，請打400電話

紫外檢測器波長低于溶劑截止波長

1）選擇合適的流動相進(jìn)行分析；2）改變檢測波長

其他

蠕動泵抽不出溶液

1）彎頭注射器抽出管路氣泡；2）清理擠壓部位；3）更換新的軟管

提示密封圈泄露超限

1）更換密封圈和/或柱塞桿；2）向右擠壓蠕動泵杠桿

Vanquish更換流通池時(shí)的注意事項(xiàng)

先關(guān)掉檢測器模塊的總電源再進(jìn)行更換