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當前位置:首頁  >  技術文章  >  賽默飛液相色譜U3000/DGLC/Vanquish使用問題

賽默飛液相色譜U3000/DGLC/Vanquish使用問題

更新時間:2023-06-26      點擊次數:9958

問題描述

可能原因

解決方案

軟件問題

提示后密封清洗液用完,添加后密封清洗液后仍然報錯

重新啟動蠕動泵:進入泵界面—More Options—將Rear Seal Wash的模式由Idle改為Active,點擊enter即可

柱溫箱溫度已達到規定范圍,但仍顯示未就緒

柱溫箱的平衡時間設置過長,可在儀器方法中修改

如何查看紫外燈能量

VWD:打開UV界面的“Wellness"選項即可查看燈壽命和使用時間;DAD:打開UV界面的“Wellness"選項可查看燈的使用時間,在Startup界面可查看燈能量

如何設置序列或者進樣完成后自動打印/導出報告

在Queue界面的“Report setup"項下進行設置

峰面積較小的色譜峰無法自動積分

在Cobra向導中設置合適的基線噪聲范圍、Cobra平滑寬度和小峰面積

如何去掉報告中的變色龍水印

打開管理控制臺——全局策略——水印,將“打印水印"的勾去掉即可

Vanquish自動進樣器無法自動識別樣品盤類型

1)齒輪松動,聯系工程師;2)樣品盤上的二維碼損壞或有液滴;3)正確放置樣品盤,使A1號位在左后方

Vanquish自動進樣器無法正常進樣

重新關好自動進樣器的門

Vanquish自動進樣器是否需要校正針位

不需要

壓力升高

色譜條件發生改變(如柱溫、流速、有機相種類等發生變化)

比較相同條件下壓力的變化趨勢,若壓力升高,再按照下述原因進行排查

保護柱的柱芯污染

更換新的柱芯

進樣閥load狀態壓力正常,切至inject狀態時壓力升高,可能是六通閥或進樣針堵塞

超聲進樣針/六通閥的定子和轉子,若無效則更換

靜態混合器堵塞

反沖靜態混合器,無效則更換。平常操作時:流動相的純度需要滿足分析檢測的要求、檢測泵內密封圈的密封性

針座密封堵塞

對針座密封超聲清洗

色譜柱填料塌陷引起流通池堵塞

反沖流通池(注意壓力:DAD/VWD耐壓120bar;FLD耐壓20bar),無效則聯系工程師

壓力傳感線接觸不良

重新拔插壓力傳感線。平常操作時注意不要觸摸到壓力傳感線接頭

新色譜柱壓力逐漸升高

新色譜柱的填料在流動相作用下逐漸壓實,柱壓會逐漸升高,但使用一段時間后,相同條件下壓力會趨于穩定

色譜柱污染

按照色譜柱說明書進行沖洗和在生,無效則更換

CAD的噴針堵塞

取出噴針進行超聲清洗(注意針尖不要和瓶底接觸)。建議檢測器入口安裝不銹鋼過濾器,阻止柱填料流失

排氣泡時未擰松purge閥

排氣泡前逆時針擰松1.5~2圈

柱前預熱或者柱后冷卻器堵塞

反沖,需要時更換

壓力ZUI高限設置不合適引起壓力超限

根據色譜柱和儀器耐受的壓力范圍設置合適的限值

樣品/緩沖鹽析出引起管路堵塞

先采用可溶性的溶劑沖洗流路。平常操作時:若流動相含有緩沖鹽,建議色譜柱先沖洗大比例水再采用初始流動相平衡;為避免樣品在流動相中析出,建議采用初始流動相溶解樣品

壓力降低

色譜條件發生改變(如柱溫、流速、有機相種類等發生變化)

比較相同條件下壓力的變化趨勢,若壓力降低,再按照下述原因進行排查

管路沒有擰緊導致溶液泄露

重新擰緊泄露處的管路

流動相走空

加入流動相并重新排氣泡。建議在儀器方法中設置合適的壓力低限

系統流路中含有大量氣泡

重新對流動相排氣泡,待基線和壓力穩定后再進樣

過濾頭堵塞:某通道溶液無法抽出,取下過濾頭后恢復正常

超聲清洗過濾頭,無效則更換

單向閥堵塞:所有通道的溶液均無法抽出

超聲清洗單向閥,無效則更換

脫氣機管路堵塞:某通道溶液無法抽出,短接脫氣機后恢復正常

沖洗脫氣機管路。平常操作時建議每周采用甲醇清洗脫氣機管路,尤其水相通道

比例閥損壞:某通道溶液無法正常抽出,更換比例閥接口后恢復正常

聯系工程師

針座密封發生漏液

更換針座密封

排氣后忘記關閉Purge閥

流動相排完氣泡后及時擰緊purge閥,但不需要擰得過緊

purge閥密封性變差

更換新的purge閥

壓力傳感線接觸不良

重新拔插壓力傳感線。平常操作時注意不要觸摸到壓力傳感線接頭

進樣時吸入空氣

1)設置合適的進樣高度;2)樣品量太少時可加襯管

進樣瞬間壓力下降,后又恢復正常

U3000:正?,F象,吸入的樣品溶液沒有經過預壓縮,為常壓狀態,高壓的流動相與常壓樣品接觸時會引起壓力下降;Vanquish:不會出現該情況

轉子發生磨損,導致部分流動相及樣品溶液直接排廢

更換轉子

單向閥裝反

重裝單向閥

壓力波動

流動相含有氣泡(一般呈規律的鋸齒狀波動)

重新對流動相排氣泡,待基線和壓力穩定后再進樣

過濾頭部分堵塞;流動相瓶及低壓區輸液管路被菌類或藻類污染

超聲清洗過濾頭和流動相瓶,沖洗低壓區輸液管路。平常操作時建議每周采用甲醇清洗脫氣機管路,尤其水相通道

單向閥部分堵塞

超聲清洗單向閥,無效則更換。平常操作時:建議儀器不要長期保存在純乙腈中;若流動相中緩沖鹽濃度過高可增加泵前溶液的混合體積

輸液泵的密封圈發生泄漏

更換輸液泵的柱塞桿或密封圈

流動相混合不均勻

1)更換更大的靜態混合器;2)若為等度分析,可將流動相提前混合

進樣后壓力不穩定,且保留時間重現性不佳

在儀器方法的自動進樣器界面設置與泵同步

脫氣盒損壞

聯系工程師。平常操作時,建議:1)所有流動相的過濾頭均置于液面以下,減少真空泵的工作負荷;2)使用正相溶劑時短接脫氣機

比例閥損壞

聯系工程師

計量泵裝置密封圈發生泄漏

更換計量泵的柱塞桿或密封圈

保留時間前移

色譜條件發生改變(如柱溫、流速、有機相種類等發生變化)

比較相同條件下保留時間的變化趨勢,若前移,再按照以下原因進行排查

流動相混合不均勻

1)更換更大的靜態混合器;2)若為等度分析,可將流動相提前混合

色譜柱未充分平衡

延長系統的平衡時間,尤其當流動相中含有離子對試劑時

色譜柱污染

表面活性劑污染時該現象尤為明顯,根據色譜柱的說明書進行沖洗,需要時更換色譜柱

固定相塌陷

更換色譜柱。平常操作時:在色譜柱規定范圍內進行使用

緩沖鹽吸潮導致配置的濃度過低

將易潮解的鹽置于干燥器中保存

保留時間后移

色譜條件發生改變(如柱溫、流速、有機相種類等發生變化)

比較相同條件下保留時間的變化趨勢,若后移,再按照以下原因進行排查

流動相混合不均勻

1)更換更大的靜態混合器;2)若為等度分析,可將流動相提前混合

轉子發生磨損,導致部分流動相及樣品溶液直接排廢

更換轉子

色譜柱未充分平衡

延長系統的平衡時間,尤其當流動相中含有離子對試劑時

系統流路含有氣泡

重新對流動相排氣泡,待基線和壓力穩定后再進樣

流動相組成發生變化

對于提前混合好的流動相,注意置于陰涼處密封保存

比例閥故障

聯系工程師

柱外死體積增加

更換內徑更小、更短的管路進行連接

保留時間不穩定

單向閥堵塞

超聲清洗單向閥,無效則更換

平衡時間不足

延長系統的平衡時間,尤其當流動相中含有離子對試劑時

流動相混合不均勻

1)更換更大的靜態混合器;2)若為等度分析,可將流動相提前混合

比例閥故障

聯系工程師

未設置柱溫

在儀器方法中設置合適的柱溫

系統流路含有氣泡

重新對流動相排氣泡,待基線和壓力穩定后再進樣

前延峰

分離不佳,大峰前部包有雜質小峰

改進色譜分析條件

柱頭前端過濾篩板部分堵塞

更換色譜柱或低流速反沖色譜柱

色譜柱塌陷

更換色譜柱,檢查色譜柱是否匹配此應用條件(壓力或pH值范圍)

溶劑效應

1)降低進樣量;2)降低樣品溶解液洗脫強度;3)調換進樣閥接口(U3000:調換進樣閥4、5號位;Vanquish:調換進樣閥1、2號位)

色譜柱過載

減少進樣量或增加柱容量(選用更大內徑色譜柱)

拖尾峰

分離不佳,大峰后部包有雜質小峰

改進色譜分析條件(緩沖鹽的濃度、流動相的pH值、洗脫條件等)

樣品與硅烷官能團反應(常規C18柱分析堿性化合物)

建議更換封尾色譜柱、特制色譜柱或添加三乙胺等掃尾劑

柱外體積過大

進樣器和色譜柱間使用更短、更細的管路連接

色譜柱過載

減少進樣量或增加柱容量(選用更大內徑色譜柱)

色譜柱柱效下降

更換色譜柱或保護柱

檢測器響應時間過長

使用推薦值

分叉峰或雙峰

分離不佳

改進色譜條件

保護柱或色譜柱污染

1)更換保護柱;2)清洗或更換分析柱

柱頭死體積過大

更換合適的管路接頭或更換色譜柱(色譜柱前端塌陷)

溶劑效應

1)降低進樣量;2)降低樣品溶解液洗脫強度;3)調換進樣閥接口(U3000:調換進樣閥4、5號位;Vanquish:調換進樣閥1、2號位)

色譜柱溫度影響

一般發生在色譜柱內徑大于3 mm,并且溫度條件很高的情況下。選用預加熱來確保色譜柱中流動相溫度不會梯度變化

儀器轉子密封磨損

更換轉子密封

鬼峰

上一針樣品未全都洗脫

延長分析時間或改用梯度洗脫

進樣器交叉污染

1)增加洗針程序;2)清洗或更換易污染部件,如針、針座密封

CAD檢測器被污染

以50%甲醇沖洗

流動相、色譜柱或流通池污染

逐一排查原因,采取相應措施,如是流通池污染可采用異丙醇以0.2ml/min低流速沖洗,特別注意水相流動相的污染

流通池有氣泡

排除氣泡

不出峰

未進樣,或進樣量不足

1)保證樣品瓶中樣品量足夠;2)檢查進樣類型是否為“Blank"

過高的背景電流/噪音(CAD)

選擇純度較高的流動相

樣品容易揮發(CAD)

查看分析物的蒸氣壓

色譜柱柱效下降

按照說明書對色譜柱進行在生,無效則更換色譜柱

負峰

不合適的參比波長(DAD)或RI檢測器參比池未充分沖洗 

DAD:設置合適的參比波長或不使用該功能;RI:增加平衡時間

樣品溶解液與流動相差別太大

使用流動相溶解樣品

洗脫物比流動相吸收值低

更換波長或使用低吸收溶劑做流動相

錯誤的信號輸出極性

檢查信號輸出極性,請打400電話

廢液引起(CAD) 

確保PEEK管在廢液瓶中

數據處理時設置了色譜圖扣除命令

不使用色譜圖扣除的功能

RI檢測器未關閉參比池通道(樣品連續流過樣品池和參比池)

關閉參比池通道

霧化針污染(CAD)

異丙醇超聲清洗霧化針,無效則更換

毛刺峰

流通池進氣泡

流通池出口增加長度的背壓管,但不能超過流通池的耐壓范圍(注意:FLD流通池耐壓<20bar,不能增加被壓管)

電壓不穩或儀器接地不正確

常見于CAD/ECD,打400電話

CAD檢測器被污染

以50%甲醇沖洗,無改進打400電話

峰面積減小

進樣器堵塞

逐段排查阻塞點,需要時請打400電話

檢測器燈能量偏低

更換新燈

檢測波長設置不合理

設置合理的檢測波長

待測物降解

使用合適的保存條件,如使用含溫控單元的自動進樣器

CAD霧化溫度過高,半揮發成份流失

降低霧化溫度

儀器有漏液

檢查漏液位置

峰面積重現性差

自動進樣器轉子密封/針座密封發生磨損

更換新的轉子密封/針座密封,需要時請打400電話

進樣針的針尖彎曲或堵塞

超聲清洗進樣針(注意針尖不要接觸瓶底),無效則更換

進樣前針位未處于inject狀態

進樣前,保證針位處于inject狀態

進樣器的注射器進氣泡

進樣前執行灌注注射器命令排除注射器內氣泡,需要時需手動排氣泡

自動進樣器抽樣速度過快

降低進樣針的抽樣速度,使抽樣時間至少3-5秒

自動進樣器的注射器密封不嚴/注射器三通閥磨損

更換新的注射器/注射器三通閥,需要時請打400電話

基線周期性波動

泵壓力波動

采集壓力通道的信號,尋找壓力波動的原因

管路或流通池中有氣泡

流動相充分脫氣

基線無規律波動

溫度波動

控制好溫度,使用對溫度較敏感的RI檢測器時要尤為注意

流動相混合不均勻

1)更換更大的靜態混合器;2)若為等度分析,可將流動相提前混合

檢測器燈能量過低

更換新燈

流通池被污染

用不同極性溶劑沖洗流通池

流動相或色譜柱被污染

更換流動相或色譜柱

電壓不穩或儀器接地不正確

常見于CAD/ECD,請打400電話

紫外檢測器波長低于溶劑截止波長

1)選擇合適的流動相進行分析;2)改變檢測波長

其他

蠕動泵抽不出溶液

1)彎頭注射器抽出管路氣泡;2)清理擠壓部位;3)更換新的軟管

提示密封圈泄露超限

1)更換密封圈和/或柱塞桿;2)向右擠壓蠕動泵杠桿

Vanquish更換流通池時的注意事項

先關掉檢測器模塊的總電源再進行更換

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