“唯快不破” SCIEX 7500+系統(tǒng)實現(xiàn)高覆蓋靶向脂質組學分析

在2024年美國質譜會（ASMS）會議上，生命科學分析技術領域的創(chuàng)新者SCIEX推出了SCIEX 7500+系統(tǒng)，這是SCIEX定量產品組合中的新款質譜儀，延續(xù)了定量可靠靈敏的傳統(tǒng)。該系統(tǒng)為科學家提供了靈敏度與耐用性的雙重保障。新的應用文章表明7500+系統(tǒng)因為超快的采集速度和靈敏度，能夠顯著提高高覆蓋靶向脂質組學分析的定量準確度、穩(wěn)定性和對于脂質同分異構體的色譜分辨率1。

展示了SCIEX 7500+系統(tǒng)下進行約2000MRM離子對的高覆蓋脂質掃描的功能和能力。

脂質分析是一個具有挑戰(zhàn)性的分析過程。首先脂質數(shù)量眾多，約有大于>150,000個脂質；其次生物體內不同脂質含量差異大，含量跨度可達10-12個數(shù)量級；脂質結構復雜多樣，且目前標準品不全。質譜法由于其靈敏度高、特異性強、定量范圍寬等技術優(yōu)勢，是目前用于脂質分析的主流技術。

SCIEX新推出的7500+三重四極桿質譜，提高了離子傳輸效率，實現(xiàn)采集速度的大幅度提升；同時兼具高靈敏度、快速極性切換和定量線性范圍寬等優(yōu)勢。在此技術上，開發(fā)了可以定性和定量約2000種脂質分子的高覆蓋靶向脂質組學分析方法。方法使用HILIC色譜進行分離，可有效減小脂質共流出，避免共流出組分的相互影響。掃描速度的提升不僅可以帶來更多的掃描點數(shù)從而提升定量的準確度和穩(wěn)定性，并且得到更好的峰形狀，提高了脂質異構體分辨率。

色譜使用Phenomenex Luna™ NH2 (100 x 2.1 mm, 2.6 µm)色譜柱. 流動相A為二氯甲烷和乙腈（7/93, v/v），流動相B為二氯甲烷和乙腈（50/50, v/v，含2mM乙酸銨）。

質譜基于多反應監(jiān)測(MRM)掃描模式高覆蓋靶向脂質組學分析方法，使用 scheduled MRM (sMRM) 模式正負離子同時掃描，檢測1925種脂質，其中正離子模式下822種，負離子模式下1103種。

不同脂質峰面積的定量的CV統(tǒng)計也表示采集度對于高覆蓋靶向組學分析的重要性。上圖顯示了5種不同脂類的示例分析物峰，計算了5次連續(xù)進樣峰面積CV值。在不同掃描速度下，以3ms掃描速度分析的各分析物的CV值低。在使用5 ms掃描速度的實驗中，分析物峰上收集的數(shù)據(jù)點較少，導致一些分析物的峰形失真，導致CV值變大。因此，更快的MRM掃描速度提高了準確度和穩(wěn)定性，全新的7500+系統(tǒng)結合自動化的分析軟件提供了更實用高覆蓋靶向組學解決方案。

圖A為1-和2-lysoPC(18:1)的4個采集速度的XIC。如藍色所示，在1.2 ms掃描速度下獲得的數(shù)據(jù)顯示為異構體的兩個不同的峰。隨著掃描速度的降低，在兩個峰上采集的數(shù)據(jù)點也隨之減少。在5 ms的掃描速度下(綠色)，兩個不同的峰不再被色譜分辨，于是丟失了脂質異構體的定量信息。

圖B所顯示的上一行的XIC上異構體1-lysoPC(16:0)為主要峰,前面的小峰為異構體2-lysoPC(16:0)。在5 ms的掃描速度下，兩個異構體之間的分離消失了。lysoPC(18:1)也有類似的情況存在（圖B下一行）。在5 ms的掃描速度下，收集的數(shù)據(jù)點太少，無法確定是否存在異構體。隨著掃描速度的提升，采集點數(shù)也隨之提升，于是異構體得以被分辨。同時結果顯示較慢的掃描速度導致分析物CV也顯著更高，會產生顯著的定量誤差。因此使用SCIEX 7500+系統(tǒng)進行快速采集的脂質組學分析提高了脂質異構體的色譜分辨率。

與傳統(tǒng)非靶脂質組學方法相比，靶向脂質組學分析脂質使用簡便、靈敏度高，并且能夠準確地識別和量化脂質，高覆蓋的靶向組學分析被越來越多地監(jiān)測生物樣品中的代謝和脂質。以上這些結果表明，SCIEX 7500+系統(tǒng)可以提高方法的準確度、穩(wěn)定性和脂質異構體分辨率，同時增加脂質測定的覆蓋范圍，整體提升高覆蓋靶向脂質組學數(shù)據(jù)質量。